常规培养悬浮细胞Jurkat,离心收集细胞后,通过载玻片直接涂片、湖南湘仪细胞涂片离心机和湖南湘仪TDZ5-WS酶标板转子低速离心机3种方法制备细胞涂片,经瑞氏-姬姆萨染色后,显微镜下观察拍照。发现直接涂片中细胞图像难以观察,效果差,而细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机制备的细胞涂片,细胞图像清晰,均可达到细胞制片要求。酶标板转子低速离心细胞制片是一种便捷的新方法。
关键词:湖南湘仪酶标板转子离心机,细胞制片。
将液体样本均匀地涂布在载玻片上,形成可以在显微镜下直接观察细胞形态和结构变化的细胞涂片,是常用的生物医学实验手段。从机体组织或培养的细胞到肉眼观察成像,整个操作过程需要良好的技术和丰富的经验。如果细胞涂片需要长期保存或其他进一步操作如细胞染色等,干燥固定是必不可少的处理措施,虽然已有商品化的专用细胞涂片离心机,但此技术在设备和方法上仍然存在着发展空间。普通离心机可以直接制备细胞涂片,贴壁培养大肠癌细胞株SW480细胞经离心机制片,保持了细胞贴壁生长的原来形状。
所需仪器:白血病T淋巴细胞株Jurkat为本实验室保存,小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)、RPMI1640培养液(杭州吉诺生物医药技术有限公司)、载玻片(江苏飞舟玻塑有限公司帆船牌)、瑞氏-姬姆萨染色液;细胞涂片离心机(美国cytospin),酶标板转子低速离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)。
本文利用实验室常备的酶标板转子低速离心机(湖南湘仪TDZ5-WS),改良细胞制片技术。