该技术是基于热力学和流体动力学第一定律,利用分析超速离心机研究蛋白、核酸和聚合物及其他各种复合物在溶液状态下的行为。
关键词:分析超速离心技术;沉降速率;沉降平衡;分子生物学
分析超速离心技术是表征离心力场中溶液状态下大分子行为的一种行之有效的方法。该技术基于两种实验模式,一种是浓度分布随时间实时改变(即沉降速率,SV),另一种是在相对低的离心力场中,沉降和扩散两种力最终达到平衡而形成稳定的浓度分布(即沉降平衡,SE)。这两种实验都是利用相同的仪器———分析超速离心机。
瑞典科学家Theodor Svedberg 于1925年发明分析超速离心技术,并于第2年制造出世界上第一台新型超速离心机,并引入紫外-可见光检测系统实时监测沉降过程,首次测量了一些蛋白质的相对分子质量。结合数据分析方法,能够确定样本纯度,表征生物分子复合物的组装和分解机制,确定亚单位的化学计量,检测和表征大分子的构象变化,并测定平衡常数和热力学参数。